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Techniques histologiques : fixation, coupes, colorations

Ce que tu dois retenir

Chapitre 1 — La fixation des tissus

La fixation stabilise les structures cellulaires en créant des ponts entre protéines.

Chapitre 2 — Inclusion en paraffine

L'inclusion en paraffine permet d'obtenir un bloc solide pour la coupe au microtome.

Chapitre 3 — Réalisation des coupes

Les coupes standard en paraffine ont une épaisseur de 5 µm.

Chapitre 4 — Les colorations histologiques

L'Hématoxyline-Éosine (H&E) est la coloration de routine en histologie.

Teste-toi

1. Quel est le rôle principal de la fixation en histologie ?

AA. Colorer les noyaux
BB. Préserver la structure tissulaire en empêchant l'autolyse
CC. Faciliter la coupe au microtome
DD. Déshydrater le tissu
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Réponse : B — B. Préserver la structure tissulaire en empêchant l'autolyse

La fixation stoppe le métabolisme et prévient l'autolyse et la putréfaction, préservant ainsi la morphologie tissulaire.

2. Quel est le fixateur de routine le plus utilisé en histologie ?

AA. Glutaraldéhyde
BB. Bouin
CC. Formol (formaldéhyde à 10 %)
DD. Alcool absolu
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Réponse : C — C. Formol (formaldéhyde à 10 %)

Le formol, solution aqueuse de formaldéhyde à 10 %, est le fixateur standard pour la majorité des prélèvements.

3. Pourquoi doit-on déshydrater le tissu avant l'inclusion en paraffine ?

AA. Pour le colorer plus facilement
BB. Car la paraffine est hydrophobe et ne pénètre pas un tissu hydraté
CC. Pour éliminer les fixateurs
DD. Pour ramollir le tissu
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Réponse : B — B. Car la paraffine est hydrophobe et ne pénètre pas un tissu hydraté

La paraffine est hydrophobe, donc l'eau doit être remplacée par un solvant miscible (éthanol puis xylène) avant l'imprégnation.

4. Quel instrument permet de réaliser des coupes histologiques fines ?

AA. Cryostat
BB. Microtome
CC. Ultramicrotome
DD. Vibratome
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Réponse : B — B. Microtome

Le microtome est l'instrument de précision utilisé pour couper les blocs de paraffine en sections de quelques micromètres.

5. Quelle est l'épaisseur standard d'une coupe en paraffine pour un examen de routine ?

AA. 1 µm
BB. 5 µm
CC. 20 µm
DD. 50 µm
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Réponse : B — B. 5 µm

En routine, les coupes ont une épaisseur de 5 µm, offrant un bon compromis entre résolution et facilité de manipulation.

6. Dans la coloration H&E, que colore l'hématoxyline ?

AA. Le cytoplasme en rose
BB. Les fibres de collagène en vert
CC. Les noyaux en bleu/violet
DD. Les polysaccharides en magenta
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Réponse : C — C. Les noyaux en bleu/violet

L'hématoxyline est un colorant basique qui se lie aux structures acides comme l'ADN nucléaire, colorant les noyaux en bleu/violet.

7. Quelle technique est utilisée pour un diagnostic rapide peropératoire ?

AA. Inclusion en paraffine
BB. Coupe au cryostat
CC. Coloration PAS
DD. Imprégnation argentique
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Réponse : B — B. Coupe au cryostat

Le cryostat permet de couper des tissus congelés sans inclusion en paraffine, fournissant un résultat en quelques minutes.

8. Quel colorant met en évidence les polysaccharides comme le mucus ?

AA. Hématoxyline
BB. Éosine
CC. PAS (Periodic Acid Schiff)
DD. Trichrome de Masson
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Réponse : C — C. PAS (Periodic Acid Schiff)

Le PAS colore spécifiquement les polysaccharides et les glycoprotéines, apparaissant en magenta.

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