Méthodes d'évaluation du stress oxydant en biochimie clinique
Ce que tu dois retenir
Le stress oxydant résulte d'un déséquilibre entre production d'ERO et défenses antioxydantes, entraînant des dommages cellulaires.
La RPE est la méthode de référence pour détecter directement les radicaux libres, mais reste peu utilisée en routine clinique.
Les produits terminaux de peroxydation lipidique comme le MDA sont les marqueurs les plus utilisés en clinique.
La capacité antioxydante totale (TAC) reflète l'ensemble des défenses non enzymatiques, mais ne renseigne pas sur les enzymes spécifiques.
Teste-toi
◆ Teste-toi
1. Quelle est la principale difficulté de la mesure directe des ERO en clinique ?
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Réponse : B — B. Leur très courte durée de vie et faible concentration
Les ERO sont extrêmement réactives et ont une demi-vie très courte (de l'ordre de la milliseconde), ce qui rend leur détection directe difficile en routine.
2. Quel est le principe du test TBARS ?
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Réponse : B — B. Formation d'un adduit coloré entre le MDA et l'acide thiobarbiturique
Le TBARS dose le MDA en le faisant réagir avec l'acide thiobarbiturique pour former un complexe rose mesurable à 532 nm.
3. La résonance paramagnétique électronique (RPE) est la méthode de référence car elle détecte :
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Réponse : C — C. Les électrons non appariés des radicaux libres
La RPE repose sur l'absorption d'énergie par les électrons célibataires placés dans un champ magnétique, permettant la détection directe des radicaux.
4. Quel biomarqueur est spécifique de l'oxydation de l'ADN ?
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Réponse : C — C. 8-hydroxy-2'-désoxyguanosine (8-OHdG)
La 8-OHdG résulte de l'oxydation de la guanine dans l'ADN et est excrétée dans les urines, servant de marqueur des dommages oxydatifs à l'ADN.
5. Que mesure la méthode FRAP ?
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Réponse : C — C. La capacité antioxydante totale par réduction du fer ferrique
FRAP évalue la capacité des antioxydants à réduire le complexe ferrique (Fe3+) en fer ferreux (Fe2+), reflétant la TAC.
6. Le glutathion réduit (GSH) est :
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Réponse : B — B. Un antioxydant non enzymatique majeur
Le GSH est un tripeptide qui neutralise directement les ERO et sert de cofacteur à la glutathion peroxydase.
7. Quelle méthode est la plus adaptée au dosage en routine clinique du stress oxydant ?
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Réponse : B — B. Dosage des marqueurs indirects comme le MDA ou la 8-OHdG
Les marqueurs stables sont facilement dosables par spectrophotométrie ou ELISA, contrairement aux mesures directes complexes et coûteuses.
8. L'anion superoxyde (O2•−) est :
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Réponse : C — C. Un radical libre dérivé de l'oxygène
O2•− possède un électron non apparié, c'est une ERO radicalaire produite notamment par la chaîne respiratoire mitochondriale.